KROMATOGRAFI

Tahukah anda ???
Kromatografi itu ???

Secara Umum kromatografi itu ....

 Kromatografi adalah teknik untuk memisahkan campuran menjadi komponennya dengan bantuan perbedaan sifat fisik masing-masing komponen.

Jenis-jenis Kromatografi

 Berdasarkan Teknik Kerja yang digunakan, antara lain :

1.    Kromatografi Kertas

2.    Kromatografi Kolom

3.    Kromatografi Lapis Tipis

4.   Kromatografi Gas

1.    Kromatografi Kertas

Kromatografi kertas adalah kromatografi yang menggunakan kertas selulosa murni yang mempunyai afinitas besar terhadap air atau pelarut polar lainnya. Kromatografi kertas digunakan untuk memisahkan campuran dari substansinya menjadi komponen-komponennya.

Prinsip Kerja Kromatografi Kertas

   Pelarut bergerak lambat pada kertas, komponen-komponen  bergerak pada laju yang berbeda dan campuran dipisahkan berdasarkan pada perbedaan bercak warna.

Cara penggunaan Kromatogarfi kertas

1.    Kertas yang digunakan adalah Kertas Whatman No.1.

2.    Sampel diteteskan pada garis dasar kromatografi kertas.

3.    Kertas digantungkan pada wadah yang berisi pelarut dan terjenuhkan oleh uap pelarut.

4.   Penjenuhan udara dengan uap, menghentikan penguapan pelarut sama halnya dengan pergerakan pelarut pada kertas.

2.  Kromatografi Kolom

Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran.

Prinsip Kerja Kromatografi Kolom

•         Didasarkan pada absorbsi komponen2 campuran dengan afinitas berbeda terhadap permukaan fase diam.

•         Absorben bertindak sebagai fase diam dan fase geraknya adalah cairan yang mengalir membawa komponen campuran sepanjang kolom.

•         Sampel yang mempunyai afinitas besar terhadap absorben akan secara selektif tertahan dan afinitasnya paling kecil akan mengikuti aliran pelarut.

Cara Penggunaan Kromatografi Kolom

1. Sampel yang dilarutkan dalam sedikit pelarut, dituangkan melalui atas kolom dan dibiarkan mengalir ke dalam adsorben (bahan penyerap).

2. Komponen dalam sampel diadsorbsi dari larutan secara kuantitatif oleh bahan penyerap berupa pita sempit pada permukaan atas kolom.

3. Dengan penambahan pelarut secara terus menerus, masing-masing komponen akan bergerak turun melalui kolom dan akan terbentuk pita yang setiap zona berisi satu macam komponen.

4. Setiap zona yang keluar kolom dapat ditampung dengan sempurna sebelum zona yang lain keluar kolom. 

3.   Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi lapis tipis (KLT) adalah cara pemisahan campuran senyawa menjadi senyawa murninya dan mengetahui kuantitasnya yang digunakan.

Kromatografi lapis tipis dapat digunakan untuk memisahkan senyawa – senyawa yang sifatnya hidrofobik seperti lipida – lipida dan hidrokarbon yang sukar dikerjakan dengan kromatografi kertas.

Prinsip kerja Kromatografi Lapis Tipis

•         KLT menggunakan sebuah lapis tipis silika atau alumina yang seragam pada sebuah lempeng gelas atau logam atau plastik yang keras.

•         Jel silika (atau alumina) merupakan fase diam.

•         Fase gerak merupakan pelarut atau campuran pelarut yang sesuai.

•         Pelaksanaan ini biasanya dalam pemisahan warna yang merupakan gabungan dari beberapa zat pewarna.

Cara Penggunaan Kromatografi Lapis Tipis

   Pada cara penggunaan KLT hampir sama dengan penggunaan Kromatografi kertas, hanya saja pada KLT fase diamnya menggunakan plat gelas/ logam/ Aluminium foil sedangkan pada kromatografi kertas menggunakan kertas saring.

4.   Kromatografi Gas

Kromatografi gas adalah proses pemisahan campuran menjadi komponen- komponennya dengan menggunakan gas sebagai fase bergerak yang melewati suatu lapisan serapan (sorben) yang diam.

Prinsip Kerja Kromatografi Gas

•         Gas pembawa (biasanya menggunakan helium, argon / nitrogen) dengan tekanan tertentun dialirkan secara konstan melalui kolom yang berisi fase diam.

•         Komponen sampel akan terabsorbsi oleh fase dim dengan kecepatan berbeda.

Cara Penggunaan Krromatografi Gas

1.    Sampel diinjeksikan ke injektor yang suhunya telah diatur.

2.    Setelah sampel menjadi uap, akan dibawa oleh aliran gas pembawa menuju kolom.

3.    Sehingga komponen akan terabsorbsi oleh fase diam sampai terjadi pemisahan.

4.   Komponen yang terpisah menuju detektor akan menghasilkan sinyal listrik yang besarnya proporsional.

5.    Sinyal listrik tersebut akan diperkuat oleh amplifier.

6.   Kromatogram akan dicatat oleh rekorder berupa puncak.

 

Cara Memelihara Kromatografi

1.    Pada kromatografi kertas & kromatografi lapis tipis, fase diam harus disimpan dalam ruang tertutup atau di tempat yang kering jauh dari sumber uap.

2.    Pada kromatografi kolom & kromatografi gas sebelum dan sesudah dipakai harap dicuci bersih kemudian dikeringkan, lalu disimpan pada tempat yang aman.